Делу время

В научных исследованиях используется обычная черная чертежная или специально приготовленная тушь для биологических исследований (Pelican Company, Hannover, ФРГ). По основным компонентам они одинаковы (уголь + консервант + + суспендирующий агент). Разница состоит лишь в степени унификации угольных частиц: они более однородны (20—30 нм) в специальной туши для биологических исследований и имеют большой разброс в обычной чертежной туши (20—50 нм). Кроме того, обычная тушь содержит агрегаты, способные тромбировать микрососуды. Поэтому перед использованием ее необходимо подвергнуть очистке, главным образом с целью исключения агрегатов. Опыт работы с различными марками отечественной туши показал, что для снижения ее токсичности и устранения агрегатов можно проделать простую процедуру: в течение 15—20 мин пробирку с тушью прогревать при 50—60° и после охлаждения отцеытрифугировать (20—30 мин при 7000—8000 об/мин) в настольной лабораторной центрифуге. Центрифугирование лучше производить в пробирке с высоким уровнем жидкости, чтобы иметь возможность без перемешивания слоев отобрать наиболее поверхностные. Полученная таким образом тушь существенно не отличается (по размеру частиц и токсичности) от зарубежной для биологических исследований. Однако необходимо учесть, что небольшие различия в концентрации угля и размере частиц все же сказываются на величине минимальных доз, дающих одинаково интенсивные изображения «меченых» сосудов. Поэтому вместо 0,1 мл/100 г веса (для туши «Pelikan») нужно вводить 0,15—0,2 мл/100 г, максимум 0,5 мл/100 г. Введение больших доз нежелательно, так как с увеличением количества вводимой туши характер «метки» становится более грубым, усиливается процесс внутрисосудистоп агрегации и пр., а также затрудняется получение ультратонких срезов для электронно-микроскопического исследования.